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teknova培養基在優化過程中的設計步驟

2022-06-14      1186
  培養基是指人工模擬細胞在體內生長的營養環境,供給微生物、植物或動物(或組織)生長繁殖的,由不同營養物質組合配制而成的營養基質,是提供細胞營養和促進細胞生長增殖的物質基礎。一般都含有碳水化合物、含氮物質、無機鹽(包括微量元素)、維生素和水等幾大類物質。
  teknova培養基的澄清度應以便于輕松的觀察到渾濁為宜、濃度應當遵循供應商建議的濃度、若無菌生產過程中使用了過濾器,能夠通過生產過程同一級別的過濾器過濾為準,如需稀釋過濾,培養基濃度應提供微生物生長能力驗證;同時培養基料液應能滿足全部覆蓋生產設備。影響該培養基滅菌效果的因素除滅菌溫度和時間外,還有培養基的成分和物理狀態、PH、微生物數量、微生物細胞含水量、微生物細胞菌齡和耐熱性、蒸汽中空氣的排除情況、攪拌和泡沫等。
  teknova培養基的優化過程中,實驗設計分為3個步驟:
  1.篩選,基于現有商業培養基進行篩選,以確定重要組分的群組以及初步優化,如使用簡單的、以實驗為依據的單次單因子方法解決復雜的優化。
  2.優化,基于DOE對已確定的重要組分進行進一步優化,主要優化基礎培養基、補料培養基、一些添加物等,如使用響應曲面法找出多變量體系中的*條件。
  3.驗證,對最終的培養基進行放大驗證,分別用優化好的培養基與現用的或商業無血清的培養基培養細胞,比較各自的生長指標與抗體表達水平。